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如何正確操作使用大鼠ELISA試劑盒?

瀏覽次數(shù):301發(fā)布日期:2025-01-17
  大鼠ELISA試劑盒在生物醫(yī)學(xué)研究中具有廣泛的應(yīng)用價(jià)值,可用于檢測多種生物標(biāo)志物,如白細(xì)胞介素、腫瘤壞死因子、生長因子、激素等。這些生物標(biāo)志物在疾病診斷、病程監(jiān)測、療效評(píng)估等方面具有重要意義。
 
  大鼠ELISA試劑盒的使用方法:
 
  1.樣本準(zhǔn)備:使用新鮮、無污染的樣本,避免溶血或長時(shí)間保存導(dǎo)致的樣本質(zhì)量下降。如需長期保存,應(yīng)低溫凍存并避免反復(fù)凍融。
 
  2.加樣與溫育:按照說明書要求進(jìn)行加樣和溫育,注意加樣角度和時(shí)間控制,避免交叉污染。
 
  3.洗板與顯色:手工洗板時(shí)需垂直拍板,避免用力過猛;洗板機(jī)洗板時(shí)應(yīng)檢查沖洗頭是否通暢。顯色反應(yīng)需避光進(jìn)行。
 
  4.讀數(shù)與數(shù)據(jù)分析:終止顯色反應(yīng)后盡快讀取結(jié)果,使用酶標(biāo)儀測定OD值并進(jìn)行數(shù)據(jù)分析。一般采用四參數(shù)或直線擬合法進(jìn)行擬合。
 
  大鼠ELISA試劑盒的維護(hù)保養(yǎng)方法主要包括以下幾個(gè)方面:
 
  -血清樣本:使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管收集血液,避免任何細(xì)胞刺激。收集后,通過3000轉(zhuǎn)離心10分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。
 
  -防止溶血:避免嚴(yán)重溶血,因?yàn)檠t蛋白中的血紅素基團(tuán)具有類似過氧化物的活性,可能干擾ELISA測定。
 
  -無菌操作:在無菌條件下分離的血清標(biāo)本可以在2~8°C下保存一周,有菌操作的標(biāo)本則建議水凍保存。長時(shí)間保存應(yīng)在-70°C以下,并注意避免反復(fù)凍融。
 
  -防污染:樣本采集及血清分離過程中應(yīng)盡量避免細(xì)菌污染,以防細(xì)菌分泌的酶對(duì)抗原抗體等蛋白產(chǎn)生分解作用,或造成非特異性干擾。
 
  -防潮:某些試劑易吸濕潮解或水解,因此需要妥善密封保存,如使用油封、水封或臘封等方法防止蒸發(fā)。
 
  -避光:一些試劑受光照影響容易變質(zhì),因此應(yīng)存放在避光的環(huán)境中。
 
  -控制溫度:試劑盒應(yīng)存放在推薦的溫度范圍內(nèi),避免高溫或低溫對(duì)試劑的影響。
大鼠ELISA試劑盒
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