日本三级吃奶头添泬无码苍井空,国产精品成人久久久久久久,丁香五香天堂网,亚洲色大成网站www

您好,歡迎進入上海莼試生物技術有限公司網站!
全國服務熱線:13585831301
上海莼試生物技術有限公司
您現(xiàn)在的位置:首頁 > 技術文章 > 大鼠晶狀體上皮細胞提取物培養(yǎng)步驟

大鼠晶狀體上皮細胞提取物培養(yǎng)步驟

瀏覽次數:867發(fā)布日期:2024-07-25

大鼠晶狀體上皮細胞提取物培養(yǎng)步驟:

一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:

1)準備MEM培養(yǎng)基(MEM:GIBCO,貨號11095-080),85%;北美胎牛血清(United States,GIBCO,貨號16000-044),15%。

2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3)凍存液:90%*培養(yǎng)基,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。

二.細胞處理:

1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或將細胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并檢查細胞密度。

2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。

對于貼壁細胞,傳代可參考以下方法:

1.棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。

2.加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。

3.按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。

4.將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

3)細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶,細胞變圓脫落后,加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中,再添加10%DMSO后進行凍存。


Contact Us
  • 聯(lián)系QQ:3004972506
  • 聯(lián)系郵箱:sdfskdfhs3004972506@qq.com
  • 傳真:86-021-60443211
  • 聯(lián)系地址:上海嘉定區(qū)嘉羅公路1661

掃一掃  微信咨詢

©2025 上海莼試生物技術有限公司 版權所有  備案號:滬ICP備17029297號-3  技術支持:化工儀器網    GoogleSitemap    總訪問量:116702 管理登陸

chinese猛1打桩浪小辉| jizzjizz日本高潮喷水| 你日的我走不了路了| 亚洲精品乱码久久久久久蜜桃图片| 国产精品人妻一区夜夜爱| 中文字幕AV人妻互换久久| 越南女与动交zoz0z| 小妖精腰细奶大h侍卫| 人妻绿帽yin乱| 日本老熟妇maturebbw| 九色丨porny丨自拍 icu | 性无码一区二区三区在线观看| 无人区码一码二码W358CC| 久久人妻熟女中文字幕av蜜芽| 国产欧美综合系列在线| 少妇又色又紧又爽又刺激视频| 亚洲精品一区二区国产精华液| 亚洲第一成人网站| 欧美精品视频| 少妇bbwbbw性生话| fc2成年免费共享视频| 纯肉高h啪动漫| 亚欧洲精品在线视频免费观看 | 妈妈的朋友在线观看| 张柏芝跪下吃j8图片| 99久久人妻无码精品系列| 色噜噜狠狠色综合久夜色撩人| 美国式禁忌在线观看| 国产suv精品一区二区69| 无码久久精品国产亚洲av影片 | 蜜桃视频app下载直播| 大胸美女视频| 国产av旡码专区亚洲av苍井空| 成人精品一区二区三区不卡免费看 | 欧美视频在线| 玩弄老年妇女过程| 小鲜肉男男gay做受xxx网站| 久久精品欧美av无码四区| 熟妇与小伙子matur老熟妇e| 亚洲国产精品无码久久久 | 先の欲求不満な人妻在线|